Новости
хирургии
Журнал включен
в систему цитирования Scopus









2017 г. №3 Том 25

НАУЧHЫЕ ПУБЛИКАЦИИ
ЭКСПЕРИМЕHТАЛЬHАЯ ХИРУРГИЯ

DOI: https://dx.doi.org/10.18484/2305-0047.2017.3.233   |  

И.В. МАЙБОРОДИH 1, В.В. МОРОЗОВ 1, А.А. АHИКЕЕВ 1, Н.Ф. ФИГУРЕHКО 1, Р.В. МАСЛОВ 1, Г.А. ЧАСТИКИH 1, В.А. МАТВЕЕВА 1, В.И. МАЙБОРОДИHА 2

МАКРОФАГАЛЬHЫЙ ОТВЕТ У КРЫС HА ВВЕДЕHИЕ МУЛЬТИПОТЕHТHЫХ МЕЗЕHХИМАЛЬHЫХ СТРОМАЛЬHЫХ КЛЕТОК В РЕГИОH ХИРУРГИЧЕСКОЙ ТРАВМЫ

ФГБУН «Институт химической биологии и фундаментальной медицины» СО РАН 1,
ФГБНУ «Институт молекулярной патологии и патоморфологии» 2, г. Новосибирск,
Российская Федерация

Цель. Доказать возможность фагоцитоза макрофагами введенных в область хирургического разреза аутологичных мультипотентных мезенхимальных стромальных клеток костномозгового происхождения (АММСККП).
Материал и методы. Методами световой флюоресцентной микроскопии с применением моноклональных антител к антигену CD68 изучали макрофагальный ответ у 12 крыс через 2 недели после инъекции в область хирургической травмы АММСККП с трансфицированным геном GFP и дополнительно окрашенными Vybrant-CM-Dil клеточными мембранами.
Результаты. Введенные в регион хирургического разреза АММСККП частично фагоцитируются макрофагами из тканей в месте инъекции. Фагоцитоз АММСККП сопровождается быстрой деградацией белка GFP, тогда как Vybrant-CM-Dil или не разрушается ферментами лизосом, или деградирует очень медленно. Происходит накопление этого красителя в макрофагах, в результате чего фагоциты приобретают способность к интенсивной флюоресценции при облучении их ультрафиолетовым светом с фильтром для родамина. АММСККП и их фрагменты могут попадать в кровеносное и лимфатическое русло и оказываться, по крайней мере, в регионарных паховых лимфатических узлах (ПЛУ), возможно захватывание АММСККП и их окрашенного детрита из просвета сосудов периваскулярными макрофагами, расположенными в отдаленных тканях. В корковом веществе ПЛУ после введения АММСККП в регион лимфосбора, на местах, соответствующих расположению лимфоидных узелков, увеличивается как число и размер скоплений крупных светящихся макрофагов, так и их количество в таких скоплениях. В некоторых фагоцитах лимфоидных узелков ПЛУ содержатся специфически окрашенные фрагменты АММСККП.
Заключение. Доказан макрофагальный фагоцитоз АММСККП из тканей в месте введения и сосудистого русла. Присутствие макрофагов с детритом АММСККП в лимфоидных узелках ПЛУ может служить косвенным подтверждением высокой вероятности инициации гуморальной иммунной защиты против антигенов, введенных АММСККП.

Ключевые слова: мультипотентные мезенхимальные стромальные клетки, лимфатические узлы, макрофаги, флюоресценция макрофагов
с. 233-241 оригинального издания
Список литературы
  1. Varol C, Mildner A, Jung S. Macrophages: development and tissue specialization. Annu Rev Immunol. 2015;33:643-75. doi: 10.1146/annurev-immunol-032414-112220.
  2. Okabe Y, Medzhitov R. Tissue biology perspective on macrophages. Nat Immunol. 2016;17(1):9-17. doi: 10.1038/ni.3320.
  3. Майбородин ИВ, Матвеева ВА, Маслов РВ, Оноприенко НВ, Кузнецова ИВ, Частикин ГА. Флуоресцирующие макрофаги в лимфатических узлах после применения мультипотентных мезенхимальных стромальных клеток с трансфицированным геном GFP. Новости Хирургии. 2014;22(5):526-32. doi: 10.18484/2305-0047.2014.5.526.
  4. Möllerherm H, Köckritz-Blickwede von M, Branitzki-Heinemann K. Antimicrobial activity of mast cells: role and relevance of extracellular DNA traps. Front Immunol. 2016;7:265. doi: 10.3389/fimmu.2016.00265.
  5. Pinke KH, Lima HG, Cunha FQ, Lara VS. Mast cells phagocyte Candida albicans and produce nitric oxide by mechanisms involving TLR2 and Dectin-1. Immunobiology. 2016 Feb;221(2):220-27. doi: 10.1016/j.imbio.2015.09.004.
  6. Levin R, Grinstein S, Canton J. The life cycle of phagosomes: formation, maturation, and resolution. Immunol Rev. 2016 Sep;273(1):156-79. doi: 10.1111/imr.12439.
  7. Naqvi AR, Fordham JB, Nares S. MicroRNA target Fc receptors to regulate Ab-dependent Ag uptake in primary macrophages and dendritic cells. Innate Immun. 2016 Oct;22(7):510-21. doi: 10.1177/1753425916661042.
  8. Mendes-Jorge L, Ramos D, Luppo M, Llombart C, Alexandre-Pires G, Nacher V, et al. Scavenger function of resident autofluorescent perivascular macrophages and their contribution to the maintenance of the blood-retinal barrier. Invest Ophthalmol Vis Sci. 2009 Dec;50(12):5997-6005. doi: 10.1167/iovs.09-3515.
  9. Mitchell AJ, Pradel LC, Chasson L, Van Rooijen N, Grau GE, Hunt NH, et al. Technical advance: autofluorescence as a tool for myeloid cell analysis. J Leukoc Biol. 2010 Sep;88(3):597-603. doi: 10.1189/jlb.0310184.
  10. Li F, Yang M, Wang L, Williamson I, Tian F, Qin M, et al. Autofluorescence contributes to false-positive intracellular Foxp3 staining in macrophages: a lesson learned from flow cytometry. J Immunol Methods. 2012 Dec 14;386(1-2):101-7. doi: 10.1016/j.jim.2012.08.014.
  11. Potter KA, Simon JS, Velagapudi B, Capadona JR. Reduction of autofluorescence at the microelectrode-cortical tissue interface improves antibody detection. J Neurosci Methods. 2012 Jan 15;203(1):96-105. doi: 10.1016/j.jneumeth.2011.09.024.
  12. Гаврилин ВН, Шкурупий ВА. Влияние накопления поливинилпирролидона в синусоидальных клетках печени на характер токсического повреждения органа. Бюл СО РАМН. 1995;(2):24-28.
Адрес для корреспонденции:
Российская Федерация,
г. Новосибирск, пр. Акад. Лаврентьева, д. 8,
ФГБУН «Институт химической биологии
и фундаментальной медицины» СО РАН,
лаборатория стволовой клетки,
тел.: 8-913-753-07-67,
e-mail: imai@mail.ru,
Майбородин Игорь Валентинович
Cведения об авторах:
Майбородин И.В., д.м.н., профессор, главный научный сотрудник лаборатории стволовой клетки ФГБУН «Институт химической биологии и фундаментальной медицины» СО РАН.
Морозов В.В., д.м.н., профессор, заведующий лабораторией инвазивных медицинских технологий ФГБУН «Институт химической биологии и фундаментальной медицины» СО РАН.
Аникеев А.А., к.м.н., докторант лаборатории стволовой клетки ИХБФМ СО РАН.
Фигуренко Н.Ф., к.м.н., докторант лаборатории стволовой клетки ФГБУН «Институт химической биологии и фундаментальной медицины» СО РАН.
Маслов Роман Владимирович, к.м.н., докторант лаборатории стволовой клетки ИХБФМ СО РАН.
Частикин Г.А., к.м.н., докторант лаборатории стволовой клетки ФГБУН «Институт химической биологии и фундаментальной медицины» СО РАН.
Матвеева В.А., к.б.н., старший научный сотрудник лаборатории стволовой клетки ИХБФМ СО РАН.
Майбородина В.И., д.м.н., ведущий научный сотрудник лаборатории ультраструктурных основ патологии ФГБНУ «Институт молекулярной патологии и патоморфологии».
Контакты | ©Витебский государственный медицинский университет, 2007