2014 г. №5 Том 22

НАУHЫЕ ПУБЛИКАЦИИ
ЭКСПЕРИМЕHТАЛЬHАЯ ХИРУРГИЯ

И.В. МАЙБОРОДИH 1, В.А. МАТВЕЕВА 1, Р.В. МАСЛОВ 2, Н.В. ОHОПРИЕHКО 3, И.В. КУЗHЕЦОВА 1, Г.А. ЧАСТИКИH 1

ФЛУОРЕСЦИРУЮЩИЕ МАКРОФАГИ В ЛИМФАТИЧЕСКИХ УЗЛАХ ПОСЛЕ ПРИМЕHЕHИЯ МУЛЬТИПОТЕHТHЫХ МЕЗЕHХИМАЛЬHЫХ СТРОМАЛЬHЫХ КЛЕТОК С ТРАHСФИЦИРОВАHHЫМ ГЕHОМ GFP

ГБУН «Институт химической биологии и фундаментальной медицины» СО РАН 1, г. Новосибирск,
ГБОУ ВПО «Московский государственный медико-стоматологический университет им. А.И. Евдокимова» 2,
ГБОУ ВПО «Новосибирский государственый медицинский университет» 3,
Российская Федерация

Цель. Установить реакции регионарных лимфатических узлов, обусловленные имплантацией аутологичных мультипотентных мезенхимальных стромальных клеток костномозгового происхождения (АММСККП) для ускорения регенерации дефекта кости нижней челюсти в эксперименте. Материал и методы. Методами флюоресцентной световой микроскопии изучали реакции регионарных лимфатических узлов крыс, обусловленные имплантацией АММСККП для ускорения регенерации дефекта кости нижней челюсти.
Результаты. Через 1 неделю после внедрения в участок повреждения кости нижней челюсти полигидроксиалканоата (ПГА) с адсорбированными АММСККП с трансфицированным геном GFP в регионарных (субмандибулярных) лимфатических узлах при исследовании в отраженном ультрафиолетовом свете были найдены овальные скопления ярко светящихся крупных клеток, до 20 мкм в диаметре. Во флюоресцирующих клетках светилась не вся цитоплазма, а разные по размерам овальные гранулы, размер которых достигал 10 мкм. Скопления светящихся клеток отличались по плотности и фоновой окраске от окружающих тканей и имели четкую границу. Это дает возможность предположить концентрирование клеток со светящейся цитоплазмой в лимфоидных узелках. На основании крупных размеров клеток, неправильной формы, наличия включений и расположения в лимфатических узлах сделано заключение, что эти объекты являются макрофагами, где светятся лизосомы с поглощенным флюоресцентным материалом. Размеры скоплений светящихся клеток и число самих объектов со свечением в них увеличивались до 2 недель после имплантации, далее началось прогрессивное сокращение и размеров и количества.
Заключение. Введенные таким способом АММСККП частично поглощаются макрофагами. При разрушении структур, сформированных из АММСККП, детрит также фагоцитируется макрофагами. В любом случае эти макрофаги оказываются в лимфоидных узелках регионарных лимфатических узлов, где не исключена инициация иммунитета против ДНК и белка GFP.

Ключевые слова: мультипотентные мезенхимальные стромальные клетки, лимфатические узлы, макрофаги, флюоресценция макрофагов
с. 526-532 оригинального издания
Список литературы
  1. Chanda D. Therapeutic potential of adult bone marrow-derived mesenchymal stem cells in diseases of the skeleton / D. Chanda, S. Kumar, S. J. Ponnazhagan // Cell Biochem. – 2010. – Vol. 111, N 2. – P. 249–57.
  2. Clines G. A. Prospects for osteoprogenitor stem cells in fracture repair and osteoporosis / G. A. Clines // Curr Opin Organ // Transplant. – 2010 Feb. – Vol. 15, N 1. – P. 73–78.
  3. Использование мезенхимальных стволовых клеток для активизации репаративных процессов костной ткани челюсти в эксперименте / А. И. Воложин [и др.] // Стоматология. – 2010. – Т. 89, № 1. – С. 10–14.
  4. Регенерация поврежденной кости нижней челюсти крыс после использования аутологичных стромальных стволовых клеток костномозгового происхождения, адсорбированных на фибриновом сгустке / И. В. Майбородин [и др.] // Морфология. – 2011. – Т. 140, № 6. – С. 79–85.
  5. Feasibility of flow cytometry for measurements of Plasmodium falciparum parasite burden in studies in areas of malaria endemicity by use of bidimensional assessment of YOYO-1 and autofluorescence / J. J. Campo [et al.] // J Clin Microbiol. – 2011 Mar. – Vol. 49, N 3. – P. 968–74.
  6. Watson J. Suppressing autofluorescence of erythrocytes / J. Watson // Biotech Histochem. – 2011. – Vol. 86, N 3. – P. 207.
  7. Distinct macrophage subpopulations characterize acute infection and chronic inflammatory lung disease / M. Duan [et al.] // J Immunol. – 2012. – Vol. 189, N 2. – P. 946–55.
  8. Technical advance: autofluorescence as a tool for myeloid cell analysis / A. J. Mitchell [et al.] // Biol. – 2010 Sep. – Vol. 88, N 3. – P. 597–603.
  9. Accumulation and autofluorescence of phagocytized rod outer segment material in macrophages and microglial cells / L. Lei [et al.] // Mol Vis. – 2012. – Vol. 18. – P. 103–13.
  10. The drusenlike phenotype in aging Ccl2-knockout mice is caused by an accelerated accumulation of swollen autofluorescent subretinal macrophages. Invest / U. F. Luhmann [et al.] // Ophthalmol Vis Sci. – 2009 Dec. – Vol. 50, N 12. – P. 5934–43.
  11. Reduction of autofluorescence at the microelectrode-cortical tissue interface improves antibody detection / K. A. Potter [et al.] // J Neurosci Methods. – 2012. – Vol. 203, N 1. – P. 96–105.
Адрес для корреспонденции:
630090, Российская Федерация,
г. Новосибирск, пр. акад. Лаврентьева, д. 8,
Институт химической биологии
и фундаментальной медицины СО РАН,
тел.моб.: +7 913 753-07-67,
e-mail: imai@mail.ru.
Майбородин Игорь Валентинович
Cведения об авторах:
Майбородин И.В., д.м.н., профессор, ведущий научный сотрудник лаборатории стволовой клетки ГБУН «Институт химической биологии и фундаментальной медицины» СО РАН.
Матвеева В.А., к.б.н., старший научный сотрудник лаборатории стволовой клетки ГБУН «Институт химической биологии и фундаментальной медицины» СО РАН.
Маслов Р.В., аспирант кафедры госпитальной пародонтологии стоматологического факультета ГБОУ ВПО «Московский государственный медико-стоматологический университет им. А.И. Евдокимова».
Оноприенко Н.В., к.м.н., старший преподаватель кафедры акушерства и гинекологии ГБОУ ВПО «Новосибирский государственный медицинский университет».
Кузнецова И.В., к.м.н., научный сотрудник лаборатории стволовой клетки ГБУН «Институт химической биологии и фундаментальной медицины СО РАН».
Частикин Г.А., к.м.н., докторант лаборатории стволовой клетки ГБУН «Институт химической биологии и фундаментальной медицины СО РАН».
Контакты | ©Витебский государственный медицинский университет, 2007-2023